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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BK-P63269 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | 詳見說明書% |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：
1）RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；
2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào)；
3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。
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產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
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甲型病毒/病毒H7亞型PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法) |
50T |
BK-P63269 |
實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其完全溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液
濃度和純度。
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照樣品的采集與預(yù)培養(yǎng)按照菌檢驗(yàn)要求進(jìn)行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。放冰上待用。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對(duì)定量）和定性分析。
主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR
髓過氧化物酶（MPO）測(cè)定試劑盒 Ranolazine 中文名：雷諾嗪 分子式：C24H33N3O4
酸性轉(zhuǎn)化酶（AI）測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/24樣 Withanolide S 63139-16-2 中文名：醉茄內(nèi)酯S 分子式：C28H40O8 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 南非醉茄; 睡茄交酯; 睡茄內(nèi)酯; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
酸性酯酶染液 Eosinstain 4,4'-Diaminodiphenylsulfone 80-08-0 中文名：4,4'-二氨基二苯砜 分子式：C12H12N2O2S 度：98.0%
酸性品紅（復(fù)紅） 5g 4,4'-Cyclohexylidenebisphenol 843-55-0 中文名：4,4'-環(huán)亞己基雙* 分子式：C18H20O2 度：98.0%
酸性木聚糖酶測(cè)試盒 可見分光光度法 50管/24樣 Testosterone enanthate 中文名：庚酸 分子式：C26H40O3
Walker氏癌256瘤株;W256 細(xì)胞，U251細(xì)胞 WEHI 231細(xì)胞，小鼠B細(xì)胞TCPP[=四(4-羧苯基)卟吩](>97.0%(HPLC)(T))TCPP
[=Tetrakis(4-carboxyphenyl)porphyrin] 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(HPLC)(T)
5637, 細(xì)胞 Human偶氮甲堿H(>97.0%(T))Azomethine H 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T)
CD180 Others Mouse 小鼠 CD180 / RP105 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 5-磺基水楊酸sulfosalicyclic acid質(zhì)量規(guī)格：AR
角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基(特定)KM-d1-氨基-2-萘酚-4-磺酸1-Amino-2-naphthol-4-sulfonic Acid 質(zhì)量規(guī)格：AR
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素HA1
(Hemagglutinin) 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 利卡西平；10,11-二氫-10-羥基卡馬西平10,11-Dihydro-10-hydroxy
Carbamazepine 質(zhì)量規(guī)格：>98%,美國進(jìn)口原裝
C127細(xì)胞，細(xì)胞 細(xì)胞,9811C11細(xì)胞 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎細(xì)胞;COS-1西替利嗪Cetirizine 2HCl質(zhì)量規(guī)格：>98%，進(jìn)口分裝
大鼠源細(xì)胞醋酸西曲瑞克Cetrorelix Acetate質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
KLK11 Others Human KLK11 / Kallikrein-11 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 白屈菜紅堿Chelerythrine質(zhì)量規(guī)格：>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品
胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)醋酸氯己定Chlorhexidine Acatate質(zhì)量規(guī)格：>98%
CD320 Others Mouse 小鼠 CD320 / 8D6A 細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 氟伐他汀鈉Fluvastatin salt質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
rsodeoxycholic acid 中文名：熊去氧膽酸 分子式：C24H40O4 度：98.0% 兔銅藍(lán)蛋白(CP)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Deoxycholic acid 中文名：去氧膽酸 分子式：C24H40O4 度：98.5% 兔細(xì)胞間粘附分子-1 (rabbit ICAM-1) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
甲型病毒/病毒H7亞型PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)Timosaponin AIII 中文名：知母皂苷AIII 分子式：C39H64O13 度：98.5% 兔干擾素-a(rabbit IFN-a) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
Diosgenin 中文名：薯蕷皂苷元 分子式：C27H42O3 度：98.0% 兔干擾素-β(rabbit IFN-β) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
Sarsasapogenin 中文名：菝葜皂苷元 分子式：C27H44O3 度：99.0% 兔干擾素-r(rabbit IFN-r) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
