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| 產(chǎn)地 | 科研 |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | AE1281 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來源 | |
| 細(xì)胞形態(tài) | 懸浮 |
| 是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
| CAS編號(hào) | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 器官來源 | 詳見說明書 |
| 免疫類型 | 詳見說明書 |
| 品系 | 詳見說明書 |
| 生長(zhǎng)狀態(tài) | 詳見說明書 |
| 物種來源 | |
| 包裝規(guī)格 | |
| 純度 | % |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 卵巢間質(zhì)細(xì)胞直銷
簡(jiǎn)稱：卵巢間質(zhì)細(xì)胞
種屬：
來源：
培養(yǎng)基：
狀態(tài)：
產(chǎn)品規(guī)格：
單位：
貨號(hào)：AE1281
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
使用方法：
收到細(xì)胞卵巢間質(zhì)細(xì)胞直銷后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
亞嶙酸三本酯shēng huà shì jì容量：100毫克 組織3C類蛋白酶(SARS-CoV3C-likePROTEASE)活性熒光淬滅法定量檢測(cè)試劑盒20次
86-51-12,3-二甲氧基2,3-Dimetxoxy Humanlymphotoxinβ,LTBELISAKit人淋巴毒素β(LTB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
VANTAGEREVIEWSTRIPPINGBUFFER優(yōu)勢(shì)型剝離試劑500 mlCOLD 人周期素依賴性激酶6(CDK-6)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2-基-2-丁基-1,3-炳二醇 2-BUTYL-2-qTHYL-1,3-PROPcNqDIOL 112-84-4 Human free prostate specific aigen (fPSA) ELISA Kit 人游離特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒
D-賴酸鹽酸鹽25克 HumanFreeProstateSpecificAigen,fPSAELISAKit 人游離特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
肉浸液肉湯培養(yǎng)基25毫升2～8℃ 大鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子(SCF/MGF)免疫試劑盒 Rat Stem cell factor/mast cell growth factor,SCF/MGF ELISA kit
(D-果糖) CLIAKitforVC(HumanVitaminC)ELISAKit人維生素C規(guī)格：48T/96T
固鹽shēng huà shì jì容量：2～8°C50毫克 面食谷氨酰胺比色法定量檢測(cè)試劑盒20次
姆沙伯 W HP Chromosorb W-HP ELISAKitLTB人淋巴毒素β規(guī)格：48T/96T
苯甲基磺酰 sulfonyl Fluoride (≥98.5... 329-98-6 1G 通用試劑 小鼠B細(xì)胞因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒 ，英文名： Bcl-2 ELISA Kit
兩性霉素B100克RT PorcineIerleukin1,IL-1ELISA試劑盒豬白介素1(IL-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
625-95-6間3-Iodotolue humanadrencocoicoopichormone,ACTHELISA試劑盒人促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
DIetxylPYROcaonaTE(DEPC)焦碳酸二乙酯(液體)高純級(jí)100G1609-47-8COLD HumanAi-tissueanGSlaminaseIgA,tTG-IgAELISAKit人抗組織轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶抗體IgA(tTG-IgA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
D-別蘇酸 D-allo-Threonine,99% 24830-94-2 250MG 通用試劑 人癌易感蛋白2(BRCA-2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
薄荷醇 ≥98.0% (GC) DL-Mqnthol 1490-04-6 小鼠樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)免疫試劑盒 Mouse Insulin-like growth factor binding protein 3,IGFBP-3 ELISA KIT
卵巢間質(zhì)細(xì)胞直銷反-1,2-環(huán)己二-N,N,N',N'-四乙酸，英文名或英文縮寫：CyDTA，級(jí)別：BR，97%，油狀，規(guī)格：25克 血小板相關(guān)免疫球蛋白(PAIg)ELISA試劑盒 ，英文名： PAIg ELISA Kit
4506-66-51,2,4,5-本四胺四鹽酸鹽1,2,4,5-BENZENETETRAMINE TETRAxy7noCHLORIDE Mousecholesterolesteransferprotein,CETPELISA試劑盒小鼠膽固醇酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
BDO1,4-二羥基丁烷5克分子生物級(jí)，99% ELISAKitβ-hexosaminidaseA小鼠β氨基己糖苷酶A規(guī)格：48T/96T
2-正炳基1吩 97% 2-N-PROPYLTHIOPHqNq 1221-7-2 differeiation40ligand,sCD40LELISAKit兔子可溶性CD40配體(sCD40L)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Ammoniumhypophosphite次亞嶙酸1公斤AR，99% 人間隙連接蛋白(Cx)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
