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| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | E0545 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來源 | 食管鱗癌；男性 |
| 細(xì)胞形態(tài) | 詳見說明書 |
| 是否是腫瘤細(xì)胞 | 否 |
| CAS編號 | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 器官來源 | 詳見說明書 |
| 免疫類型 | 詳見說明書 |
| 品系 | 詳見說明書 |
| 生長狀態(tài) | 貼壁 |
| 物種來源 | 人 |
| 包裝規(guī)格 | 瓶 |
| 純度 | 詳見說明書% |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
產(chǎn)品簡稱：KYSE270細(xì)胞
中文名稱：人食管鱗癌細(xì)胞
規(guī)格：瓶
種屬：人
來源：食管鱗癌；男性
培養(yǎng)基：1640
狀態(tài)：貼壁
單位:
貨號：E0545
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
KYSE270細(xì)胞 | 瓶 | E0545 |
帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。
帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過量不足，過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
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3',5'-二羥基苯乙酮(>98.0%(GC)) 3',5'-Dihydroxyacetophenone 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 大鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA檢測試劑盒Ratglycogensyhasekinase,GSKELISAKit 96T/48T
3',5'-芐氧基苯乙酮(>97.0%(GC)) 3',5'-Dibenzyloxyacetophenone 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC) 人白介素1β轉(zhuǎn)換酶(ICE)試劑盒 Human Ierleukin 1β conveing enzyme,ICE ELISA Kit
3,5-二甲氧基芐醇(>98.0%(GC)) 3,5-Dimethoxybenzyl Alcohol 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 英文名稱MouseLBPELISAKit小鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)規(guī)格：96T/48T
3,5-二甲氧基芐(>96.0%(GC)) 3,5-Dimethoxybenzyl Bromide 質(zhì)量規(guī)格：>96.0%(GC) PH2-3顯色(CRESOLRED)指示溶液50毫升
3,5-二-1-三甲基硅基苯(>97.0%(GC)) 3,5-Dibromo-1-trimethylsilylbenzene 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC) Porcineansforminggrowthfactorβ1,TGF-β1ELISA試劑盒豬轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
3',5'-二-4'-羥基苯乙酮(>97.0%(GC)) 3',5'-Dibromo-4'-hydroxyacetophenone 質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(GC) 小鼠兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒 ，英文名： CA ELISA Kit
3,5-二羥基苯甲酰胺(>98.0%(HPLC)(N)) 3,5-Dihydroxybenzamide 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(N) 大鼠己糖激酶(HK)ELISA檢測試劑盒RatHexokinase,HKELISAKit 96T/48T
3,5-二芐氧基(>98.0%(GC)) 3,5-Dibenzyloxybenzaldehyde 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC) 人白介素-1β前體(Pro-IL-1β)試劑盒 Human IL-1β Precursor,Pro-IL-1β ELISA Kit
六 Hexaphenylbenzene 質(zhì)量規(guī)格： 92.40-97.20 %(碳元素分析) 英文名稱MouseLPSELISAKit小鼠脂多糖(LPS)規(guī)格：96T/48T
1,3,5-三(4-羧基苯基)苯(>98.0%(HPLC)) 1,3,5-Tris(4-carboxyphenyl)benzene 質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC) PH3-4顯色(METHYLORANGE)指示溶液50毫升
人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞RNAHUAEC miRNA5 μg硫酸異帕米星質(zhì)量規(guī)格：含量≥670μg/mgIsepamicine Sulphate
G401細(xì)胞，人Wilms細(xì)胞 大鼠垂體細(xì)胞,RPC細(xì)胞 CL-0462UMR-106(大鼠細(xì)胞)5×106cells/瓶×2蓓薩羅丁;貝沙羅汀質(zhì)量規(guī)格：>99%Bexarotene
HCC94(人子宮鱗癌細(xì)胞(高分化)) 5×106cells/瓶×2氯前列醇鈉(D型）質(zhì)量規(guī)格：>98.5%D-Cloprostenol
hCD133+-CB-c single donor 從臍帶血提取的人類CD133+祖細(xì)胞(hCD133+-CB)，單一捐獻(xiàn)者 100000 大鼠垂體細(xì)胞RPC氯前列醇鈉(DL型）質(zhì)量規(guī)格：>98.5%,USP34DL-Cloprostenol
CSC, 小鼠心肌細(xì)胞鹽酸川芎嗪(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Ligustrazine HCl
KYSE270細(xì)胞C6, 大鼠腦細(xì)胞H-89(PKA抑制劑)質(zhì)量規(guī)格：>98%,10mg/ml,進(jìn)分H-89 2HCl
FCGRT & B2M Others Mouse 小鼠 FCGRT & B2M Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 夫西地酸質(zhì)量規(guī)格：>97%,BRFusidine
大鼠腦內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL夫西地酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品Fusidine
LLC-PK1豬腎近曲小管上皮細(xì)胞 LLC-PK1 porcine kidney proximal tubular epithelial cells M199+3% FBS/DMEM+F12+12%FBS3--L-酪氨酸質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR3-Iodo-L-tyrosine
IFNB1 Protein Mouse 重組小鼠 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)鹽酸雙環(huán)胺（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：供TCL鑒別用DICYCLOMINE HYDROCHLORIDE
注意事項(xiàng)：
KYSE270細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太小；
（5）嚴(yán)格的無菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。
