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產(chǎn)品簡(jiǎn)稱：BT-474 [BT474]細(xì)胞
中文名稱：人乳腺導(dǎo)管癌細(xì)胞

規(guī)格：瓶

種屬：人

來源：浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌；女性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

單位:

貨號(hào)：E0105

帛科細(xì)胞培養(yǎng)器材的選擇：從培養(yǎng)量大小來講，從小到大有細(xì)胞培養(yǎng)板、細(xì)胞反應(yīng)管、搖瓶、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、細(xì)胞工廠等，更大就是反應(yīng)器了。

帛科細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)面積從25-225平方厘米不等，一般都經(jīng)過表面改性處理，適合細(xì)胞貼壁和生長(zhǎng)。225ml 、175ml的多用于大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)用（如單克隆細(xì)胞的培養(yǎng)等），75ml的多用于一般性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)用（一般性的傳代，保存細(xì)胞，為實(shí)驗(yàn)提供細(xì)胞等），25ml一般是用來復(fù)蘇細(xì)胞或細(xì)胞較少時(shí)的培養(yǎng)，還有做原代細(xì)胞時(shí)也可以做多瓶而避免交叉污染。產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和注意事項(xiàng)：
1.細(xì)胞復(fù)蘇
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37oC預(yù)熱的DMEM完全培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2.細(xì)胞傳代
帛科細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%（過量不足，過晚細(xì)胞狀態(tài)不佳，1:2至1:10以上的比率傳代培養(yǎng)，一般1:3至1:5細(xì)胞一代，即從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段時(shí)間，非細(xì)胞有絲分裂次數(shù)）時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入胰蛋白酶（注意：消化液的量以蓋住細(xì)胞*，*消化溫度是37oC。顯微鏡下觀察細(xì)胞：倒置顯微鏡下觀察消化細(xì)胞，若胞質(zhì)回縮，細(xì)胞之間不再連接成片，表明此時(shí)細(xì)胞消化適度）進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。 
加入適量DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
加入DMEM完全培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

3.細(xì)胞凍存
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉完全培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。加入胰蛋白酶進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。加入DMEM完全培養(yǎng)基終止胰蛋白酶消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM完全培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入lml凍存液（90%胎牛血清，10% DMSO。 
一般來講血清含量可以在10%-90%之間調(diào)整，凍存液中加入血清一方面可以為細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)，另一方面可以在細(xì)胞凍存過程中提供非滲透性保護(hù)物質(zhì)，如蔗糖，白蛋白等從而更好地保護(hù)細(xì)胞），放入凍存管內(nèi)（管內(nèi)有異丙醇，以保證溫度降低的速度），立即放入4oC冰箱中凍存30min，然后放入-20oC冰箱中凍存30min，再置于-80℃冰箱內(nèi)過夜。
*天放入液氮中，可以保存至少兩年，如不放人液氮，可以保存三個(gè)月。 
細(xì)胞凍存和復(fù)蘇的原則是：慢凍速融，這樣更加有利于保持細(xì)胞的活力。凍存細(xì)胞不加任何保護(hù)劑，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶的產(chǎn)生，從而使細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機(jī)械損傷，引起細(xì)胞內(nèi)環(huán)境滲透壓，PH，電解質(zhì)等的改變，進(jìn)而促使細(xì)胞死亡。
以下是公司正在熱銷的相關(guān)產(chǎn)品：

Humanpituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAPELISAKit人垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  19-Nortestosterone acetate  中文名：19-去甲睪酮乙酸鹽  分子式：C20H28O3 

Humanpigmeepithelium-derivedfactor,PEDFELISAKit人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  18-Hydroxytritriacontan-16-one  97191-42-9  中文名：  分子式：C33H66O2 

HumanPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISAKit人0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  17β-Benzoyloxy-androsta-1,4-dien-3-one  中文名：17β-苯甲酰氧基-雄甾-1,4-二烯-3-酮  分子式：C26H30O3 

HumanPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKELISAKit人0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  17α-Thevebioside  114613-59-1  中文名：  分子式：C36H56O13 

HumanPhosphorylatedacetylCoA,PaCoAELISAKit人0酸化乙酰輔酶A(PaCoA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T  17α-Estradiol  中文名：17α-雌二醇  分子式：C18H24O2
熊果苷  Arbutin  質(zhì)量規(guī)格：≥98%，BR Humanai-rabiesvirusaibody,ai-RVELISA試劑盒人抗毒抗體(ai-RV)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氯化血根堿(標(biāo)準(zhǔn)品)  Sanguinarine chloride  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 植物細(xì)胞色素C氧化酶活性測(cè)定試劑盒20

亞麻木酚素（標(biāo)準(zhǔn)品）  Secoisolariciresinol Diglucoside  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Humaumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand1,AIL-R1ELISAKit人相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(AIL-R1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氨基丙二酸  Aminomalonic acid   質(zhì)量規(guī)格：≥98%,BR 小鼠骨涎蛋白(BSP)ELISA試劑盒 ，英文名： BSP ELISA Kit

AZD4547  AZD-4547  質(zhì)量規(guī)格：>98%,FGFR抑制劑 大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)ELISA檢測(cè)試劑盒Raudimealbovineserumalbumincheck-upELISAKit 96T/48T

代森鋅  Zineb  質(zhì)量規(guī)格：>90% 人鼻病毒(RV)抗體(IgA)試劑盒 Human rhinovirus(RV)aibody(IgA)ELISA kit

雷公藤堿(標(biāo)準(zhǔn)品)  Wilforine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 RatVitaminA,VAELISAKit大鼠維生素A(VA)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

新藤黃酸(標(biāo)準(zhǔn)品)  Neogambogic acid  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 OXALATE(氨鹽)血液抗凝液100毫升

延齡草苷（標(biāo)準(zhǔn)品）  Diosgenin glucoside  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 Porcineinsulin-likegrowthfactors-1,IGF-1ELISA試劑盒豬樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

N-反式-對(duì)香豆酰酪胺(標(biāo)準(zhǔn)品)  N-p-CouMaroyltyraMine;Paprazine  質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品 小鼠骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)ELISA試劑盒 ，英文名： CTX-2 ELISA Kit
OK負(fù)鼠腎細(xì)胞 OK opossum kidney cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS葡聚糖凝膠G-50;交聯(lián)葡聚糖G-50(粗顆粒)質(zhì)量規(guī)格：分類范圍3×100000Sephadex G-50

IFNA14 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)L-(+)-扁桃酸;S-扁桃酸質(zhì)量規(guī)格：>99.0%,BR(S)-(+)-Mandelic acid

MS751(人子宮頸表皮癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 Ana-1(巨噬細(xì)胞)利拉萘酯(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品Liranaftate

MGC80-3(MGC-803)人細(xì)胞萘普生鈉質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP32,BRNaproxen

GDNF Others Human 人 GDNF 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 萘普生鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定Naproxen
BT-474 [BT474]細(xì)胞CL-0362HS 683(人腦細(xì)胞)5×106cells/瓶×2標(biāo)準(zhǔn)溶液(0.05000mol/L(0.1N))質(zhì)量規(guī)格：0.05000mol/L(0.1N)Iodine solution

DPP7 Others Mouse 小鼠 DPP7 / DPPII / DPP2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑：水)質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,溶劑：水Iodine solution

小鼠成纖維細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL鈧標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,基體:1.0mol/L HNO3)質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml,基體:1.0mol/L HNO3Scandium standard

BALB/3T3 clone A31小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 BALB/3T3 clone A31 mouse embryo fibroblasts DMEM培養(yǎng)基+10%FBSL-羥基脯氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品L-Hydroxyproline

IL36A Protein Human 重組人 IL1F6 / IL36A 蛋白L-羥基脯氨酸質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRL-Hydroxyproline
注意事項(xiàng)：
BT-474 [BT474]細(xì)胞（1）預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱；
（2）用75%酒精擦拭經(jīng)過紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手；
（3）正確擺放使用的器械：保證足夠的操作空間，不僅便于操作而且減少污染；
（4）點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太小；
（5）嚴(yán)格的無菌操作；
（6）貼壁細(xì)胞消化適度：消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響，消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化，一旦胞質(zhì)回縮，連接變松散，或有成片浮起的跡象就要立即終止消化；
（7）傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次*只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作，每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染；
（8）傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。